카테고리 보관물: Microscope

광학 현미경

FILM CROSS SECTION -OBSERVATION

필름 단면 관찰 현미경 (특허기술)

JNO-FM-BXSET

필름 전용 현미경으로 찍은 샘플 사진 (동일 샘플)

– 필름 단면 관찰 영상 –

일반 현미경에서 필름 관찰시 문제점

  • 필름 단면이 고르지 않다.
  • 필름 단면 전체에 초점을 맞추기가 어렵다.
  • 필름이 가늘어서 관찰면을 고정하기가 어렵다.
포장재 필름의 단면 관찰 (특허 기술 )

필름 단면 관찰 전용 현미경의 특징

  • 필름 단면을 고르게 절단 가능하다.
  • 필름 단면이 전체적으로 초점 영역에 맞음
  • 샘플을 관찰하기 편하게 고정하여 관찰 가능
  • 샘플의 회전이 용이하여  원하는 각도를 쉽게 맞출 수 있음.
  • 샘플의 변경시 초점이 거의 변하지 않아 작업이 편함.
  • 투과 반사 조명 모두에 상기의 장점을 모두 활용 가능함.

ELECTROPHYSIOLOGY MICROSCOPE

AcquCAM Mono Camera for Physiology

CA3-pyramidal neuron_Alexa- Fluor-488 (This Image taken by AcquCAM 23S)
CA3-pyramidal neuron_Alexa- Fluor-488 (This Image taken by AcquCAM 23S)

Simultaneous observation
fluorescence observation image and IR-DIC image

Multi-Dual Port ( JNO-DPTS made by J.H.Jin )

AcquCAM 23S2 with Electro-Phyology

전기생리학 실험을 위한 패치 전용 카메라

전기생리학 전용 현미경 OLYMPUS BX51WI / BX61WI

형광 이미징용 광원장치 – CoolLED pE-340fura

XY-MOVER & BRIDGE STAGE
(JNO-WI-3 made by JNOPTIC Co., ltd)

XY-MOVER

전기생리학 전용 현미경 기능 개선

Accessories

전기생리학 – Best Image

IR – DIC 촬영 조건

  • NIR Camera : AcquCAM 23S
  • Microscope : OLYMPUS BX51WI

IR-DIC 와 형광이미지의 동시 촬영

Simultaneous observations ( IR – DIC & 형광 ) 촬영 조건

  • NIR Camera : AcquCAM 23S
  • Microscope : OLYMPUS BX51WI
  • Multi Dual Port : JNO-DPTS (개발자: J.H.JIN )

구형 OLYMPUS BX-WI의 이미지 업그레이드

NIKON 현미경의 이미지 개선 ( by J.H.JIN )

업그레이드 전 업그레이드 후 이미지 비교

이미지의 상단을 클릭하시면 원본이미지를 보실 수 있습니다.

FISH

Fluorescence In Situ Hybridization
– 형광동소보합법 –

Many factors influence the quality of FISH

1. Processing & storage2. Specimen3. Probes
4. Microscope5. Filters6. Light source
Many factors influence the quality of FISH
Inadequat Contrast Image for FISHGood Contrast Image for FISH
필터 선정시 고려 할 사항설 명
ContrastSignal / Noise ratio =
MORE CONTRAST
BrightnessSave time, increase throughput
and reduce eye strain with brighter images
Color SeparationDistinguish between colors
more easily and exclude unwanted colors
RegistrationEach filter set produces images that are aligned with images from other filter sets
형광 필터 선정시 고려할 포인트

현미경 교육 자료

HISTORY OF THE MICROSCOE

광학 현미경의 역사

단렌즈 현미경 – Single Lens Microscope

발명자 : 안톤 판 레이우엔훅 ( Anton van Leeuwenhoek : 1631 ~ 1723)

복식현미경 – Compound microscope

robert hooke microscope에 대한 이미지 검색결과
발명자: 로버트 후크 ( Robert Hooke : 1635 ~ 1703 ))

가시광선을 주로 사용하는 광학 현미경은 상기와 같이 단렌즈 현미경으로 시작하여 대물렌즈와 접안렌즈를 조합하여 사용하는 복합현미경의 모습으로 기본 구조를 갖추어 왔습니다. 또한 보다 높은 배율을 추구할 수록 흐려지는 이미지의 질을 높이기 위한, 수 많은 시도의 결과로 현재 우리는 양질의 이미지를 볼 수 있는 현미경을 사용할 수 있습니다.

또한 일반인이 흔히 알고 있는 광학현미경은 Bright Fileld 라고 불리는 관찰법으로써 설명 할 수 있습니다. 하지만, 이 관찰법만으로는 다양한 샘플을 보고자 하는 탐구자들의 욕구를 만족시키기 어렵기 때문에, 보다 다양한 관찰 방법이 개발되어 왔고, 향후에도 새로운 관찰법이 끊임없이 개발될 것으로 기대됩니다.

참고로, 오늘날의 대표적인 현미경 관찰법을 열거하자면 BF, DF, PO, Simple PO, DIC, PH, FLUORESCENCE 등을 들수 있습니다.

전자 현미경

SEM ; Scanning Eelectron Microscope

원자 현미경

AFM ; Atomic Force Microscope

CKX53

CKX53 –
Compact type Inverted Microscope

소형 도립 현미경

배양 세포 관찰 

향상된 이미지 품질과 인체공학 설계로, Olympus CKX53은 라이브 셀 관찰, 세포 샘플링 및 처리, 이미지 캡처, 그리고 형광 관찰을 포함한 다양한 세포 배양 샘플에 뛰어난 성능과 효율적인 관찰 흐름을 제공합니다.  

라이브 셀 관찰

통합 위상차( iPC : Integrated Phase Contrast ) 현미경

CKX53 iPC 시스템을 이용하여 대물렌즈 배율( 4x, 10x, 20x , 40x ) 변경시, 콘덴서 측의 위상차 링슬릿의 연동 변경이 필요 없게 되어 효율적인 관찰 작업이 가능하고, 또한 위상차 설정이 틀어짐에 대한 수시 조정이 필요없어 언제나 선명한 샘플 관찰이 가능합니다.

2X 배율, FN 22의 대물렌즈로 선명하고 넓은 시야

PLN2X 대물렌즈를 위한 링 슬릿, CKX3-SLPAS는 직경 11 ㎜ , 시야수 22 ㎜ 를 갖습니다.

2X 대물렌즈는 다른 대물렌즈 보다 확연히 높은 contrast를 제공하여, 투명한 샘플도 명확하게 식별할 수 있습니다. 예를 들어, 96-웰 마이크로 플레이트 관찰시, 넓은 시야로 인하여 스테이지를 움직이지 않고 웰의 모든 세포를 관찰 할 수 있습니다.

IVC (Inversion Contrast) 기술을 사용한 3D 셀 관찰

새로 개발된 IVC 기술로, 위상차보다 시야 심도는 좁아지며, 개체의 모양이나 투명도와 관계없이 삼차원 이미지를 선명하게 합니다. 또한, IVC 관찰은 후광 효과나, 방향성 있는 그림자를 배제하여, 개체의 선명한 관찰을 가능하게 합니다.
* 10X 대물렌즈 (PLCN10X, CACHN10XIPC)는 새로운 IVC 관찰에 사용할 수 있습니다.

Glass Heater for microscope

TPi-CKX53X ( Thermo Glass Plate )

Microscope: Olympus CKX53 series

Applicable stage: XY mechanical stage CKX3-MVR

  • Setting range: ambient ~ 60℃
  • Plate dimension: W190 x D138
  • Heating area: W174 × D127
  • Glass thickness: 0.5 ㎜

형광 관찰 (Fluorescence Microscopy)

다양한 형광 시약과 선명한 시야

100 W 수은 램프 (U-LH100HG), 130 W 고압 수은 램프 (U-HGLGPS), 그리고 타사(3rd Party) LEDs*와 같은 여러 통합 광원을 이용하여 형광 이미지를 선명하게 관찰할 수 있습니다. 일반 연구용 형광현미경 IX3 및 BX3 에서 사용하는 미러 유닛을 동일하게 사용 할 수 있습니다.

3개의 형광미러 유닛을 장착할 수 있으나, Bright Field 관찰과 위상차 관찰에 영향을 줄 수 있으니 유닛 선택시 고려할 필요가 있습니다.

AcquCAM 23GR2 & CKX53
Image taken by AcquCAM 23GR2 with LUCPlanFLN40x Ph2, 1x Adapter, CKX53

밝은 조건에서 높은 Contrast

“Umbra Shield”는 특히 CKX53을 사용한 형광 관찰을 위해 설계되었습니다. 차단막은 실내 광원을 효과적으로 차단하여 형광의 대비를 향상하여 밝은 실험실 조건에서도 선명한 형광 관찰이 가능합니다. 위상차를 사용하는 경우, Umbra 차단막을 들어 올려 표본에 빛을 통과시킬 수 있습니다.

효율적인 세포 샘플링을 위한 사용자 중심 디자인

무균 조건에서의 효율적인 세포 관찰

CKX53 현미경은 UV 차단 코팅 덕분에 UV 살균 공정 중에 그대로 둘 수 있습니다. 이 시스템은 약 7kg (15.4lb)으로 이전 모델보다 가볍고 설치 공간이 더 작기 때문에 실험실 공간을 덜 차지합니다. 또한, 한 손으로 현미경을 움직일 수 있으며 관찰 경통의 목 부분을 이용하여 쉽게 운반 할 수 있습니다.

멸균 벤치 환경에서 간편한 세포 샘플링

CKX53의 접안렌즈와 광축/포커스 노브 사이의 거리가 짧으므로 작업자의 손의 위치를 자연스럽게 잡을 수 있어서 초점 및 셀 샘플링이 용이합니다.

다양한 세포 배양 용기를 사용할 수 있습니다.

CKX53의 공용 홀더로, 디쉬, 마이크로플레이트, 플라스크를 포함한 다양한 용기에서 배양된 세포를 확인하기 쉽습니다. 옵션 홀더가 부착되면, 최대 세 개의 35㎜ 배양 용기를 스테이지에 장착할 수 있습니다. 또한, 다양한 마이크로플레이트를 별도의 홀더 없이 다룰 수 있습니다.

다층 조직 플라스크(Multi-Layer Tissue Flask)를 위한 종합적인 관찰

CKX53의 폭과 탈착 가능한 콘덴서로 다층 조직 플라스크와 같은, 최대 190 ㎜ 높이의 배양 용기도 볼 수 있습니다. PLCN4X 대물렌즈의 우수한 초점 심도로 다층 조직 플라스크 내 바닥 두 개의 층의 세포를 빠르고 편하게 관찰할 수 있습니다.

다양한 용기를 사용하여 관찰 유연성 증대

홀더 암을 들어 올려서 수동으로 세포 배양 용기를 배치할 수 있습니다. 또한, 스테이지는 좌우로 최대 70 ㎜ 까지 확장할 수 있습니다.

Fluorescence microscopy

형광 현미경 관찰법 (검경법)

Fluorescence Microscopy

  • 물체에 강한 빛을 조사할 때 발현되는 형광을 이용하여 물체의 구조를 관찰하거나 형광의 유무와 색조를 이용하여 물질을 판별한는 현미경입니다.
  • 발현되는 형광의 양을 측광하여 물질의 특성을 파악하고자 하는 경우에도 사용되고 있습니다.
  • 일반 생물 현미경은 주로 투과 조명을 사용합니다만, 근래의 형광현미경은 주로 반사조명을 사용하고 있습니다.

형광 현미경 샘플 이미지 ( by J.H.JIN )

Fluorochrome
( Fluorophores or Fluorescent Probes)

형광은 특정 파장의 빛을 흡수하는 동시에 다른 파장(흡수 파장보다 긴 파장), 작은 에너지의 빛을 반사하는 분자현상입니다. 이 과정은 excitation(여기) 와 emission(방출, 발광) 으로 알려져 있습니다.

유기 및 비유기의 많은 물질들은 형광 특성을 가지고 있습니다. 형광 현미경을 사용하는 초기의 현미경 학자들은 1차 형광 또는 자가 형광을 주로 보았으나, 지금은 매우 밝은 형광을 가지는 많은 염료(fluorochrome)가 개발되었고 이는 시편의 특정 부분을 염색하는데 사용이 됩니다. 이러한 방법은 2차 혹은 간접 형광이라고 합니다.

이러한 염료는 형광색소(Fluorochrome) 라고 하는데, 항체와 핵산과 같은 다른 유기 합성 물질을 결합할 때는 fluorescent probes 혹은 fluorophores로 불려집니다. (하지만, 일반적으로 이러한 용어들은 종종 같은 의미로 사용되어 지고 있습니다. )

형광 현미경의 구조 및 형광의 특성

형광 현미경 ( 좌 ) 과 명시야 현미경 ( 우 ) 의 광로 비교

  • 형광을 발현하기 위해서는 빛이 흡수가 필요합니다.
  • 형광은 여기광의 입사방향과 관계없이 모든 방향으로 발현합니다.
  • 일반적으로 형광의 강도는 여기광에 비교하여 매우 약합니다.
  • 형광 파장은 여기광과 관계없이 일정합니다.
  • 형광의 파장은 여기광(흡수광)의 파장보다 깁니다.(Stroke’s law)
  • 형광은 정도의 차는 있지만 소광 또는 퇴색합니다.

응용분야 로는

  • 의학,치학,약학 생물학의 기초연구 등
  • 임상위생검사, 가축위생, 식물내해 등의 시험연구 등
  • 화학, 약품, 반도체관련 등의 공업분야에서도 넓게 사용되어지고 있다.