현미경 기본이론
작성자 : 진재환 (jhjin@jnoptic.com)
광학현미경의 관찰방법(검경법)
금속 및 산업현미경
Reflected Illumination Microscopey
생물현미경
Transmitted Illumination Microscopy
형광현미경
Fluorescence Microscopy
UV excitaion
Blue excitaion
Green excitaion
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| 검경법 | 검경법 설명 |
|---|---|
| 명시야 관찰 Bright Field | 기본관찰법으로, 투과형 현미경에서는 쾰러조명 설정을 숙지하는 것이 가장 중요합니다. |
| 암시야 관찰 Dark Field | 직접광을 샘플에 조사한 후에 발생한 산란광 만을 이용하는 검경법 |
| 간이편광 관찰 Simple Polarization | 편광필터 2개(편광자, 검광자)를 이용한 검경법 |
| 전용 편광 관찰 Polarization | 광학적이방체의 편광 특성을 검출하여, 암석과 광물의 연구에 주로 사용되는 검경법 |
| 위상차 관찰 Phase-contrast | 샘플을 염색하지 않고, 투명한 샘플의 구조와 상태 변화를 관찰하기 위한 검경법 |
| 미분간섭 관찰 DIC | 두꺼운 샘플에서 후광 효과를 배제하여, 투명한 샘플을 보다 세밀히 관찰하기 위한 검경법 |
| 호프만 모듈레이션 Hoffman Modulation Contrast | DIC와 같이 입체감이 있는 관찰이 가능하다. 특징으로는 플라스틱 샤레 등의 편광성이 있는 용기에서 사용가능한 검경 |
| 형광 관찰 Fluorescence microscopy | 물체에 강한 빛을 조사할 때 발현되는 형광을 이용하여 물체의 구조를 관찰하는 검경법 |
쾰러조명 이란?
조명에 의해 만들어 지는 결상계와 샘플에 의해 만들어지는 결상계가 서로 영향을 미치지 않도록 설계되어 있으며, 조명의 결상에 의해 발생하는 샘플의 이미지 저하를 최소화 한 조명계입니다.
특히, 바이오현미경(투과 조명)을 사용하시는 분은 쾰러조명에 대한 교정방법을 반드시 숙지하셔야 합니다.
critical illumination : 예전에 사용하였던 조명 방법으로 조명의 결상계과 샘플의 결상계가 같은 위치에 결상되기 때문에, 샘플의 관찰시 조명의 상과 샘플의 상이 겹쳐저 보이게 됩니다.
수차(aberration)의 종류
자이델의 5수차 (The Five Seidel Aberrations )
- Spherical Aberration ( 구면수차 )
- Coma ( 혜성형 수차 )
- Astigmatism ( 비점수차 )
- Curvature of field ( 상면만곡 ) _ 대물렌즈의 보정 표시 ( PLAN )
- Distortion ( 왜곡 )
색수차 ( Chromatic aberration )
가시광선 대역에 있어서 파장이 짧은 보라색의 빛과 파장이 긴 붉은색의 빛의 굴절율을 보면 파장이 짧을 수록 렌즈를 통과할때 굴절율이 더 크고, 파장이 길수록 굴절율이 더 작기 때문에 하나의 렌즈로 빛을 결상하게 되면 파장에 따라 결상 위치가 다른 현상이 발생합니다. 현미경에서 사용되는 대물렌즈는 이러한 색수차에 의한 문제점을 보정 하는 정도로 다음과 같이 대물렌즈의 등급을 분류하고 있으나, 참조 바랍니다.
- Achromat – 저가형 현미경에 주로 사용되어지는 렌즈
- Flourite ( Semi-Apo ) – 연구용으로 자주 사용되는 범용 렌즈
- Apochromat – 색수차 보정이 가장 잘 된 고가의 렌즈
현미경 교육자료
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